A epidermólise bolhosa (EB) é uma dermatose rara e importante, que pode ser fatal em casos extremos. Os sintomas da EB persistem por toda a vida: formação de bolhas induzidas mecanicamente, feridas crônicas, cicatrização deficiente, dor, infecções secundárias, alopecia, perda das unhas, cicatrizes e fibrose. O espectro das apresentações clínicas e da gravidade é extremamente amplo. Os principais subtipos incluem a EB simples, EB juncional, EB distrófica e EB tipo Kindler. Até o momento, variantes patogênicas já foram identificadas em mais de 20 genes. As formas graves são de difícil abordagem e tratamentos baseados em evidências são necessários com urgência.

• O diagnóstico preciso da EB é fundamental não apenas para o tratamento, mas também é um pré-requisito para a alocação dos pacientes em ensaios clínicos.
• A análise genética pode ser realizada em um único gene, se houver um gene candidato evidente, ou em um painel de genes.
• Quando a classificação não for possível, o sequenciamento de exoma pode ser empregado.
• Todas estas técnicas podem levar ao diagnóstico preciso.

• Assim como em outras doenças genéticas, novas abordagens terapêuticas estão em investigação.
• Estas incluem abordagens curativas (terapia gênica, terapias baseadas em proteínas e RNA), regenerativas (uso de células somáticas, células-tronco mesenquimais, transplante de medula) e uso de drogas modificadoras da doença (pequenas moléculas e biológicos).
• A terapia gênica ex vivo com queratinócitos tem sido empregada na EB por mais de 13 anos.
• Nessa técnica, células-tronco cultivadas dos ceratinócitos, conhecidas como holoclones, produzem lâminas de epitélio utilizadas para restaurar os defeitos cutâneos graves.
• Em estudo recente, o uso tópico e intradérmico de gentamicina foi capaz de suprimir mutações sem sentido (mutações que impedem a tradução de um gene) e induzir a formação de colágeno tipo VII e fibrilas de ancoragem em pacientes portadores de EB.
• O tratamento com a gentamicina pode representar uma opção prontamente disponível para pacientes com EB distrófica recessiva com mutações sem sentido.

• Diferentes tipos de terapia gênica com queratinócitos têm sido investigados na EB, empregando ou um vetor retroviral ou a edição de genes com CRISPR/Cas9. [1-3]
• Esta última técnica tem se mostrado eficiente em modelos murinos e, portanto, representa uma estratégia promissora.
• A inserção de genes nos queratinócitos empregando o vírus HSV-1 também se encontra em estudo.
• Outro grupo demonstrou que uma ou duas injeções subcutâneas de oligorribonucleotídios anti-senso, em doses de 400 μg até 1 mg, restauram a expressão do colágeno VII e a formação de fibrilas de ancoragem in vivo em um modelo de xenoenxerto do equivalente cutâneo da EB distrófica recessiva. [4]
• Em um procedimento inovador, foi demonstrado que as culturas de queratinócitos transgênicos autólogos foram capazes de regenerar uma epiderme totalmente funcional em uma criança de 7 anos portadora de uma forma devastadora e potencialmente fatal de EB. [1]
• O padrão de integração proviral foi mantido in vivo e a renovação da epiderme não causou qualquer seleção clonal.
• O rastreamento clonal demonstrou que a epiderme humana é sustentada não por progenitores equipotentes, mas por um número limitado de células-tronco de longa vida, detectadas como holoclones, que podem se autorrenovar in vitro e in vivo e produzem progenitores que reabastecem os queratinócitos.

• Embora promissora, a terapia gênica, até o momento, só obteve sucesso em um único caso.
• Apesar de bem documentado, esse caso não substitui um ensaio clínico.
• Ademais, o procedimento é muito caro e exige hospitalização prolongada.
• Os processos regulatórios parecem também ser complicados.
• O sucesso da terapia gênica exige o desenvolvimento de vetores mais seguros e com baixo potencial oncogênico.
• O tratamento deve ter início o mais precocemente possível.

• A terapia gênica ex vivo é exequível, como demonstrado em vários estudos de validação de conceito.